(2024年7月17日更新) [ 日本語 | English ]
ソラマメ (Vicia L.)ソラマメ (V. faba L.)クサフジ・ヒロハクサフジ・オオバクサフジ クサフジ (V. cracca L.)
小葉: 膜質広線形9-12対、披針形-広線形、側脈鋭角
葉: 両面に白い軟毛 |
[エングラー体系] |
蚕豆/空豆, broad bean or fava bean (語源: 豆果が空に向かい付く)
= ノラマメ(野良豆), ナツマメ(夏豆), テンマメ(天豆), シガツマメ(四月豆), コヤマメ(高野豆) 生活型: 一年草-越年草作物: 秋に播種 → 春収穫 分布 地中海-西南アジア → 8世紀頃渡来(説)利用: 食用 → 塩茹で等 染色体と体細胞分裂の観察目的: 試薬作成および染色方法確認 + 染色体観察および体細胞分裂理解発芽方法: V. fabaを水道水tap waterに一昼夜つける(直ではなくペーパータオル等に挟み湿らす程度で十分) 観察方法(原則): 固定 → 染色 → 準備 → 観察 本実験 (case)
→ プリン塩基の特異的遊離により生じたデオキシリボースのアルデヒド基がfuchsinと反応し核・染色体は赤紫色に染まりDNA存在を示す。最適反応条件下でFeulgen stainにより呈色されたDNAを顕微分光測定法により定量可能 Leuco Fuchsin作成
⇒ 1N HCl作成 固定↓ 根端細胞をCarnoy's fluidにつける (時間: 2', 15', 40')↓ 水道水で10'-15'洗浄 (rinse with tap water for 10'-15') ↓ 1N HCL加える (add 1N HC) (時間: 0', 3', 7.5', 15', 30') 0'とは1N HClに入れるが60C°にしないコントロール ↓ 速やかに10''間加水分解 (hydrolysis) を60°C (± 10°C)で加水分解は同時に浸軟(maceration)を行ったことになる ↓ 洗浄 (rinse)↓ 暗所にて1時間以上シッフ試薬で染色 (Schiff's reagent with staining over 1 hr in the darkness ↓ 洗浄 (rinse) 45%酢酸で保存 (stock in 45% acetic acid) 結果と考察 results and discussion染色体観察は fixative 15', hydrolysis 7'が最適であった自然状態で体細胞分裂中期発見難しいが、観察から2n = 12であった
構成: (S-chromosome = 5 paris) + (M-chromosome 1 pair) |
化学物質が細胞分裂に与える影響Effects of 5-amino colchicine on cell division目的: 5-aminouracidとcolchicineの組み合わせ処理でmetaphase染色体を多量(70%まで)に蓄積した報告がある。同様処理と試薬単独処理で細胞分裂への効果を知る。2試薬の一般的作用機作を調べ結果を考察する 試薬: Carnoy's fixative, 0.05% colchicine = 0.05 g/700 ml, 750 ppm 5-aminouracid = 0.52 g/700 ml, 1N HCl, 45% acetic acid 実験材料: Vicia faba, primary roots → soaking, ca 19 hrs → 湿ペーパータオル上で発芽(4-5日間) 実験器具: ビーカー(500 ml × 4)、アルミホイル、ポンプ、固定瓶 7 -8個、Feulgen's nucleal reaction必要器具一式 実験計画 (Au = auxin, Col = colchicine): ① ② 0 H2O 3 H2O 22 H2O 35 Control |----------|-------------|-------------------| ③ ④ 0 Col 3 22 H2O 35 Col |==========|-------------|-------------------| ⑤ ⑥ 5-Au |0 5-Au 22 H2O 34 Chol 35 Col |========================|-----------|-------|①-⑥各処理時点で3本ずつ根をとり、軽く水洗しLaCour 2BE (or Crnoy's fixative)固定(20分-12時間以上)し、Feulgen's nucleal reaction行う。この際、細胞分裂状態と分裂率を特に見る
表. Vicia faba根端分裂時間 期 G1 S G2 M Total 時間 (hr) 4.9 7.5 4.9 2.0 19.3 ---------------- ----- Interphase Mitotic phase |